极超敏（飞克）ECL发光底物
货号：U10012
规格：100mL
储存：2~8℃
价格：￥498元
·产品描述
极超敏增强型化学发光显色液是辣根过氧化酶（HRP）的催化底物，可由辣根过氧化酶催化，产生化学发光反应。该试剂盒可以灵敏地检测出低至1fg级目的蛋白。本产品采用了新型的信号增强剂和氧化剂，并对成份做了优化，显著提高了产品的稳定性和发光持续时间，同时降低了显色的背景。本产品比普通ECL试剂敏感度高数百倍。辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对X光胶片曝光，也可直接进行荧光CCD扫描。主要用于WB检测以及化学发光免疫检测系统。
·产品组成
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组分
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u10012(for 1,000 cm2) |
U10013(for 5.000 cm2) |
保存方法 |
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极超敏ECL发光底物-A液 |
50 ml |
250 ml |
4-8℃ |
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极超敏ECL发光底物-B液 |
50 ml | 250 ml |
4-8℃ |
·保存方法
4-8℃保存，一年有效。
·产品优势
1. 具有较高的灵敏度和信噪比，可检测低至100 fg级蛋白条带。
2. 可使用更高的抗体稀释倍数，大大节省抗体。对于进口抗体，推荐稀释比例：
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一抗 1：2,000～1：20,000
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二抗 1：10,000～1：100,000
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3. 发光迅速，发光强度2小时内保持稳定；发光时间长达12小时。
4. 工作液在72小时内保持稳定。
·使用说明
1.按照常规Western Blot操作，二抗孵育并洗膜完成后，新鲜配制发光工作液：分别取等体积的A液和B液，混匀后，室温放置备用。
【注】取A液和B液时一定要更换枪头；工作液的体积至少能够完全覆盖膜（至少100ul/cm2膜）。工作液配好后室温可稳定放置72小时，没有用完的工作液可短时间内存放于4℃。
2.用镊子将膜取出，膜的非蛋白面置于吸水纸上，完全去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上，置于洁净保鲜膜上。用吸头将配制的工作液转移到蛋白膜上，使其均匀覆盖，室温孵育1-2分钟，孵育时无需避光。
【注】大多数情况下1分钟孵育时间已经足够，长时间孵育不会增加灵敏度。
3.用镊子夹持蛋白膜的一端，使膜的下边缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的工作液，留下少量的液体，不可让膜完全干燥。膜的蛋白面朝上，包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡，固定在X片暗盒
内。若使用CCD扫描，无需去除膜上多余的工作液，孵育完成后直接扫描即可。
【注】使用X光胶片时，一定要保证膜上留有液体，否则会造成发光时间短，信号不稳定。
4.在暗室中取一张X片置于包裹的膜上，合上暗盒，根据信号强弱，选择合适的曝光时间，如数秒到数分钟。取出X片立即显影定影。
【注】肉眼可见的信号强度，曝光数秒即可。肉眼不可见的信号强度，首次曝光1分钟。然后根据其曝光强度，调整下一张X片的曝光时间。对于微弱的信号，曝光时间可延长至数小时。如果背景过高可减少曝光时间，或者重新洗膜。
·注意事项
1.使用X光片压片时一定要保证膜上留有工作液，否则会造成发光时间短，信号不稳定。
2.本产品对膜上蛋白没有任何影响，如需多次孵育抗体，务必洗干净膜上残留的显影液，否则会影响抗体的结合。
