·产品描述

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶 (Trypsin) ，EDTA 等。胰蛋白酶是一种丝氨酸水解酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段，水解细胞间的蛋白质，破坏细胞间的连接，从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关，在 PH 8.0 和 37℃时，胰酶的作用能力最强，因此使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。一般常用胰酶的工作浓度为 0.25%，而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度（0.05%）的胰酶进行细胞消化。由于 EDTA 能够螯合 Ca2+和 Mg2+，从而破坏细胞连接促进细胞的解离，因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的 EDTA 混合使用，以增强解离效果。
0.25% Trypsin-EDTA , Phenol Red含有 0.25% 的胰蛋白酶 (Trypsin) 和 0.91mM 的 EDTA 和酚红，溶于无钙镁平衡盐溶液中，经过滤除菌，可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品为改良型，除了具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点之外，消化时间更短，消化效果媲美进口产品，特别适用于难消化的细胞，为您节省实验时间。

·保存方法

-20℃保存，有效期一年。

·使用说明
1.贴壁细胞的消化：
a)吸去培养液，用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
b)加入少量 Trypsin-EDTA 消化液，盖过细胞即可，一般细胞 37℃放置 20 秒-2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同， 对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c)显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
d)如果发现消化不足，可加入Trypsin-EDTA 消化液重新消化。
e)如果发现细胞消化时间过长，未及时吹打细胞，则直接把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2.组织的消化：
不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

·注意事项
1.由于组织或细胞性质不同，实验人员应依据具体情况，确定最佳消化时间；消化细胞时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状况。
2.本产品不含抑菌剂，在使用过程中要特别注意无菌操作，避免消化液被微生物污染。
3.不宜 4℃长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
d)如果发现消化不足，可加入Trypsin-EDTA 消化液重新消化。
e)如果发现细胞消化时间过长，未及时吹打细胞，则直接把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2.组织的消化：
不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

• 0.25-Trypsin-EDTA，Phenol Red- 说明书点击下载　>>