1x红细胞裂解液(无菌)
货号：U10024
规格：200mL
储存：2~8°C
价格：￥200元
·产品描述
| 产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
|
U10024 |
1x红细胞裂解液(无菌) |
200 mL |
1x红细胞(RBC)无菌裂解缓冲液专为高效裂解人外周血、骨髓和小鼠造血组织(例如，脾脏组织)中的红细胞而设计， 同时对淋巴细胞的影响极小。本缓冲液含有氯化铵。能够引起无核红细胞渗透压的变化，使红细胞在裂解液作用下破裂。可用于裂红后细胞的继续培养、流式或分子生物学分析等。
·保存方法
2-8℃保存,有效期一年
·使用方法
人全血裂解步骤:
1.用合适的抗凝管收集全血。
2.每|mL人血加入 10 mL1xRBC 裂解缓冲液，充分混合均匀。
3.室温孵育 10 分钟(不超过 15 分钟)。
4.加入20-30 ml1x 无菌 PBS 终止反应。
5.2-8℃ 下 300-400 g 离心细胞5min，用适合实验步骤的无菌缓冲液(如PBS、RPMI1640)重悬细胞。
6.细胞计数后用于后续实验。
小鼠全血裂解步骤:
1.用合适的抗凝管收集全血。
2.每1mL 小鼠血液加入 10 mL 1xRBC 裂解缓冲液，充分混合均匀。
3.室温孵育 4-5 分钟，期间偶尔振荡(此步骤可在冰上进行)。
4.加入 20-30 ml 1x无菌 PBS 终止反应。
5.2-8℃ 下 300-400 g 离心细胞5min，用适合实验步骤的无菌缓冲液(如PBS、RPMI1640)重悬细胞。
6.细胞计数后用于后续实验。
小鼠脾细胞的裂解步骤:
1.在无菌条件下获取小鼠脾脏并制备单细胞悬液。
2.在2-8℃下以300-400g 离心细胞，弃去上清液(此步骤可在冰上进行)。
3.每个脾脏用5mL1xRBC 裂解缓冲液重悬细胞，充分混合均匀。
4.室温孵育 4-5 分钟，期间偶尔振荡。
5.加入 20-30 mL 1x无菌 PBS 终止反应。
6.2-8°C下 300-400g 离心细胞5min，用适合实验步骤的缓冲液(如PBS、RPMI1640)重悬沉淀。
7.细胞计数后用于后续实验。
·注意事项
1.无菌操作:若用于细胞培养，需在超净台内操作，确保所有试剂、器皿均无菌。
2.一般来说，少量残留红细胞不会干扰增殖实验，可在流式细胞术分析中被排除。如有需要，可进行第二轮裂解。
3.对于富含红细胞的样本(如骨髓)，可重复裂解1-2次;对某些脆弱细胞(如原代细胞)，建议使用4℃预冷裂解液以减少损伤。
